显微镜倍数的计算方法
在使用过程中,很多客户询问这样一个问题:通过数字摄像机输送到计算机屏幕的图像中物质颗粒到底被放大了多少倍?为了让客户有个更清楚的了解和认识,现将一些关于数码显微镜的放大倍数的知识做个简单总结。
基础知识
1.光学显微镜的放大倍数
光学显微镜的放大倍数是指目镜的放大倍数乘以物镜的放大倍数,这就是我们用肉眼通过目镜所观测到的。理论上这个放大倍数是可以任意的,只要把物镜和目镜的放大倍数做的足够大。但实际上,受到光源波长的限制,根据瑞利判据,分辨率不能小于观察波长的1/2,可见光波长约400-700nm,即采用短波长的紫光的情况下,下线分辨距离越200nm。而实际上光学显微镜较多可以做到放大1000倍(油镜可以做到大一些,约1400倍),那么大于这个倍数的光学显微镜是没有意义的,因为图像模糊。
2. 工业摄像机常用的CCD或者COMS靶面尺寸有1、2/3、1/2、1/3、1/4英寸,具体的对应的传感器对角线尺寸如下:
1英寸:靶面尺寸为宽12.7mm*高9.6mm,对角线16mm。
2/3英寸:靶面尺寸为宽8.8mm*高6.6mm,九龙坡生物荧光显微镜,对角线11mm。
1/2英寸:靶面尺寸为宽6.4mm*高4.8mm,对角线8mm。
1/3英寸:靶面尺寸为宽4.8mm*高3.6mm,对角线6mm。
1/4英寸:靶面尺寸为宽3.2mm*高2.4mm,对角线4mm。
2.
计算公式
1.数字放大倍数 = 监视器尺寸 * 25.4/CCD或CMOS靶面尺寸(即对角线尺寸大小) ;(1英寸=25.4mm);
2.系统总放大倍数 = 物镜放大倍数 *适配镜放大倍数(显微镜与相机的连接头中镜片放大倍数)* 数字放大倍数 ;。
例:
A.光学显微镜的物镜放大倍数4-100倍(其中100倍需要用油);
B.1倍连接头(即内部镜片放大倍数为1);
C.CMOS对角线尺寸1/2英寸;
D.计算机显示器尺寸17英寸。
那么该系统的数字放大倍数=17 * 25.4/8=53.975,总下线放大倍数=4*1*53.975=215.9,校验生物荧光显微镜,总上线放大倍数=100*1*53.975=5397.5。
注意:如果图像不是显示器尺寸,则应按照图像实际尺寸计算。还有一种较直接的计算放大倍数的方法,就是直接利用显微镜测微尺,将测微尺图像显示在计算机屏幕中,然后用直尺直接测图像中测微尺的长度,2个值的比值即为实际放大倍数。
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人有高有矮,这使得仪器需求成为个人问题。例如,精密生物荧光显微镜,为一定的任务配备的显微镜,有配件和特定的工作距离,其现有高度可能相当不适合特定的用户。如果观察高度过低,观察者在工作时将被迫向前弯曲,导致颈部肌肉紧张。因此在理想状态下,显微镜的观察高度和视角,应根据用户的体形调整。此外,可变的观察高度,是用来防止完全久坐不动的姿势的方法。它允许观察者采用个人坐姿,并按照自然的冲动周期性地改变,以便不时左右移位。的确,椅子的高度可以改变,这样一种放松、微微弯曲的姿势代替了之前的正襟危坐,但这不是要好方法。更简单、更舒适的方法是使用一种可变的双目镜筒,以弥补身高的差异。
由于采用了模块化产品的方法,带有 CMO 设计的立体显微镜可以根据用户的尺码或工作习惯提供的多种方式定制仪器,因而是选择方案。
照 明
在立体显微镜中,照明是将所有的工作暴露在光线下的关键。正确的照明将仅仅通过改变光的类型,便使所需的结构可视化,或有关样品的新信息被发现。重要的是,将照明正确地匹配到正确的显微镜和正确的用途上。
现代立体显微镜照明系统基于持久的发光二极管,并提供*特的方式,将解决方案整合到整个显微镜系统。高度整合的环形光源和使用中的偏振器,是为了减少标本上的眩光。
照明类型入射入射光主要用于不透明的标本。此种光(环形光、射灯等)的实现方法将取决于标本纹理和使用需求。入射光为各种各样不透明的标本所需要。根据标本纹理和结果目标,入射照明方案的一种折衷选择是可用的。透射光透射光对于各种透明标本很理想,范围从生物样品(如生物模型)到聚合物。标准透射明视野照明标准透射明视野照明用于所有类型的透明标本,其具有高对比度和足够的颜色信斜透射照明此种照明技术用于几乎透明、无色的标本。由于照明的斜位置,可以实现标本更大的对比度和视觉清晰度。暗视场照明立体显微镜中的暗视场观察,需要一个包括反射镜和遮光板的的台子,以便将一个倒置的照明空心锥体以倾斜角度向标本方向移动。暗视场照明的原理要素,对于立体显微镜和更传统的复式显微镜是相同的,生物荧光显微镜售卖,通常配有复杂的多镜头聚光镜系统、或带有内镜的聚光镜,该内镜包含调整为特定几何形状的反射面。清晰、透明标本的对比方法Rottermann Cocd 是一种局部照明技术,其显示亮度不同时折射率的改变。相位结构通常在正地形对比中表现为立体的、浮雕式的图像(如山丘),而在倒转地形对比中表现为凹进。此种技术提供了许多变量视图,以此提取上好可能的信息量。
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